1. Ingredient functional
Ingredientul functional al NKCP responsabil de reducerea riscului de tromboza este o peptidaza secretata de natto bacillus (B.subtilis natto). Aceasta peptidaza este una din proteinele care sunt continute de natto pe care noi, japonezii o ingeram ca o baza zilnica. Activitatea peptidazei poate fi poate fi constanta prin promovarea hidrolizei folosind un substrat sintetic pentru plasmina sau fibrina artificiala. Activitatea trombolitica a natto si produsul partial purificat obtinut prin fermentarea Bacillus subtilis natto a fost demonstrata in studiile pe oameni si caini.
NKCP are o activitate stabila a peptidazei iar ingredientele sale active majoritare sunt proteine cu masa moleculara de 34.000-45.000 daltoni secretatate de B. subtilis natto, apartinand serin proteazei. Activitatea este stabila la un pH intre 6.0 – 10.0 iar optimul este de 9.0. NKCP este stabil la o temperatura sub 60⁰C. Activitatea peptidazei este masurata prin determinarea abilitatii de a hidroliza un substrat sintetic foarte specific de plasmina (S-2251) iar determinarea cantitativa este realizata utilizand ELISA, prin masurarea cantitatii de antigen care reactioneaza la anticorpii specifici pentru fragmentul de bacillopeptidaza F.
Proteaza secretata de Bacillus subtilis natto dupa multiplicarea exponentiala
|
Proteaza
|
Gena
|
Proprietati
|
|
Bacillopeptidaza F
|
Bpr
|
Greutatea moleculara prin SDS-PAGE:47kDA¹⁾, 48kDa²⁾ Secretata ca 92kDa proteine si convertita proteine de masa moleculara 80kDa si 48kDa ²⁾. Are activitate mare de esteraza si proteinaza.i
|
|
Proteaza neutra
|
Npr
|
Exoproteinaza majoritara ca si cu apr.
|
|
Proteaza extracelulara
|
Epr
|
Greutate moleculara prin SDS-PAGE: 40-34kDa
|
|
Metaloproteaza
|
Mpr
|
Greutate moleculara prin SDS-PAGE: 28kDa
|
|
Subtilisin proteaza (alcalina)
|
apr
|
Greutate moleculara prin SDS-PAGE:20kDa⁴⁾, 28kDa⁵⁾ Nattokinaza. A fost confirmata activitatea sa de descompunere a cazeinei si activitatea fibrinolitica directa. A fost de asemenea raportata abilitatea de a descompune si inactiva inhibitorul activatorului de plasminogen de tip 1 (PAI-1).
|
1) Journal of Bacteriology, Vol.172, pp. 1019-1023,1990
2) The Journal of Biological Chemistry, Vol.265, pp. 6845-6850,1990
3) The Journal of Bacteriology, vol.172,pp. 1470-1477,1990
4) Sumi, et al., Experientia, Vol.43,pp.1110-1111,1987
5) The Journal of Biological Chemistry, Vol.276,pp.24690-24696,2001
6) Mol Gen Genet 1990 May;221 (3): 486-490
|
